
液相色譜儀色譜柱的使用方法是什么?大家都知道,液相色譜儀中的色譜柱屬于消耗品,如果不注意色譜柱的使用方法,隨著使用的時(shí)間和次數(shù)的增加,液相色譜儀會(huì)出現(xiàn)色譜峰高降低、柱效下降的現(xiàn)象,所以不僅僅要注意儀器的保養(yǎng),也要注意使用方法。那么液相色譜儀色譜柱的使用方法是什么呢?下面天恒儀器小編告訴大家。
反相柱
分別用甲醇:水=90:10、純甲醇、二氯甲烷等溶劑著流動(dòng)相,依次沖洗,每種流動(dòng)相流經(jīng)色譜柱不少于20倍的色譜柱體積。然后再以相反的次序沖洗。
正相柱
分別用正己烷、異丙醇、二氯甲烷、甲醇等溶劑做流動(dòng)相,順次沖洗,每種流動(dòng)相流經(jīng)色譜柱不少于20倍的柱體積(異丙醇粘度大,可降低流速,避免壓力過(guò)高)。注意使用溶劑的次序不要顛倒,用甲醇沖洗完后,再以相反的次序沖洗至正己烷。所有的流動(dòng)相必須嚴(yán)格脫水。
離子交換柱
長(zhǎng)時(shí)間在緩沖溶液中使用和進(jìn)樣,將導(dǎo)致色譜柱離子交換能力下降,。用稀酸緩沖溶液沖洗可以使陽(yáng)離子柱再生,反之,用稀堿緩沖溶液沖洗可以使陰離子柱再生。
可以使保留時(shí)間相對(duì)恒定,對(duì)需要進(jìn)行的定性鑒別可提高其可信度;保留時(shí)間的重復(fù)性是色譜分析進(jìn)行定量的基礎(chǔ),這一點(diǎn)在色譜儀檢定規(guī)程中有嚴(yán)格的要求。不同的保留時(shí)間不僅不能判斷其成份的一致性,同時(shí),由于保留時(shí)間不同峰面積也必將發(fā)生變化,其檢測(cè)結(jié)果的可信度將受質(zhì)疑。
溫差較大時(shí),因保留時(shí)間不穩(wěn)將增加檢測(cè)工作的復(fù)雜性。溫度低的時(shí)候,因流動(dòng)相黏度增加而使檢測(cè)時(shí)間延長(zhǎng),同時(shí)增加泵的磨損,影響設(shè)備的使用壽命。如果溫度過(guò)低也可能出現(xiàn)堵塞高壓恒流泵、管路、進(jìn)樣閥、色譜柱的現(xiàn)象。其原因就是溫度低溶解度相對(duì)下降而出現(xiàn)緩沖鹽結(jié)晶。溫度低時(shí)還因溶解度下降使雜質(zhì)吸附在填料上而難于洗脫,從而影響色譜柱的使用壽命。