
液相色譜儀過濾有哪些要求?液相色譜儀在實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常會出現(xiàn)一些小問題,其中就有顆粒物進(jìn)入HPLC系統(tǒng)導(dǎo)致柱子堵塞,我們都知道任何顆粒物進(jìn)入HPLC系統(tǒng)后都會在柱子入口端被篩板擋住,然后柱子被堵住,所以我們要盡可能防止顆粒物進(jìn)入HPLC系統(tǒng),所以需要進(jìn)行過濾,那么液相色譜儀過濾有哪些要求?下面就給大家詳細(xì)介紹一下。
為了防止顆粒物進(jìn)入HPLC系統(tǒng)中,從而延長儀器和色譜柱的使用壽命,并提高數(shù)據(jù)的可靠性,我們要從三個方面做好過濾工作:
1、流動相
如果流動相均由高效液相色譜級溶劑組成,流動相沒有必要過濾。這是因?yàn)楦咝б合嗌V級的有機(jī)溶劑,例如乙腈、甲醇等,在制造的工藝過程中都已經(jīng)過了0.2μm微孔濾膜過濾。同樣的,無論你是買的HPLC級的水還是在實(shí)驗(yàn)室使用超純水凈化系統(tǒng)制備的水,最后一步也是通過0.2μm微孔濾膜。
然而,如果有任何一種緩沖液中加入了固體物,例如磷酸鹽,流動相過濾將是必要的一個步驟。雖然緩沖鹽可能是可溶解的、高純的,但它還是可能含有顆粒物質(zhì),例如在蓋試劑瓶的塑料內(nèi)蓋時,塑料瓶蓋子與瓶口邊緣擠壓就會產(chǎn)生塑料顆粒。在這種情況下,添加的一種固體物可能完全溶解了,但是少量雜質(zhì)顆粒存在于流動相中成為殘渣。
2、被測樣品
液相系統(tǒng)中的第二個顆粒物來源是被測樣品。一些實(shí)驗(yàn)室在將他們的樣品放置在自動進(jìn)樣器盤(或手動進(jìn)樣)以前,所有樣品都先通過一個0.45μm針筒式過濾器過濾。這是一個有效除去被測樣品中顆粒物的方法。但是這個過程也有一點(diǎn)需要關(guān)注:你使用了針筒式過濾器就不可能100%得到通過過濾器的被測樣品,總會有或多或少的丟失。
丟失來自這樣幾方面:過濾器濾膜的吸附、過濾器濾出的顆粒物上的吸附、針筒式濾膜過濾器與針筒連接處的滲漏等。如果有丟失,過濾后液體中被測物的含量或濃度與原基本樣液的含量或濃度還相同嗎?這個問題一般需要通過實(shí)驗(yàn)確認(rèn)。
3、儀器系統(tǒng)部件的磨損物
最后,在HPLC系統(tǒng)中顆粒物的另一個主要來源是輸液泵密封墊和進(jìn)樣閥旋轉(zhuǎn)軸的磨損。關(guān)于輸液泵密封墊的磨損更換有兩種不同建議。