影響色譜柱性能的因素有哪些,色譜柱廠家教你用好色譜柱[行業(yè)熱點]
影響色譜柱性能的因素有哪些?隨著HPLC的普及,分析方法學(xué)的開發(fā)成為一個合格的分析研究員的標配,而色譜柱的篩選是分析方法開發(fā)的第一步,也是最重要的一步,在我們使用色譜柱的時候會有很多因素影響它的性能,那么影響色譜柱性能的因素有哪些?下面就給大家詳細介紹一下。
影響色譜柱性能的物理參數(shù)
(1)硅膠純度
硅膠純度和殘留金屬離子濃度,硅膠的雜質(zhì)會影響化合物的峰形,硅膠表面的金屬含量高會影響堿性化合物的峰形,易發(fā)生拖尾。
(2)色譜柱尺寸
填料床的長度和內(nèi)徑,增加色譜柱長度,可以在一定程度上提高柱效,但也會升高壓力和導(dǎo)致峰展寬;寬柱徑,提高載樣量,但也會增加橫向擴散,同樣會導(dǎo)致峰展寬。窄柱徑可以節(jié)約溶劑,可減少橫向擴散,但壓力較大,對系統(tǒng)要求較高。
(3)顆粒形狀及粒徑
球形顆粒柱效高、重現(xiàn)性好、柱床結(jié)構(gòu)均勻,不規(guī)則形柱床結(jié)構(gòu)不均勻、流動相線速度不均勻,容易譜帶展寬;平均顆粒直徑,粒徑越小,柱效越高,柱壓也越高。粒徑分布越廣則柱效越低,壓力越大。
(4)顆粒表面積
顆粒外表面和內(nèi)部孔表面的總和,以m2/g表示,相對而言高表面積對樣品具有較強的保留能力,更大的柱容量和分離度。而低表面積能更快達到平衡狀態(tài),更適合梯度洗脫程序。
(5)孔徑
顆粒的孔或腔的平均尺寸,范圍是80~300?,大孔徑的填料顆粒可以延長大分子溶質(zhì)在填料表面的滯留時間,改善分離,所以大孔徑填料適合分離大分子化合物或者水動力體積較大的分子。
以上就是影響色譜柱性能的幾個因素,我們在使用色譜柱時要注意這幾個點,這樣才能保證色譜柱的正常效果,不影響實驗進程及實驗結(jié)果。如需繼續(xù)了解色譜柱相關(guān)消息或者更多相關(guān)資訊,歡迎閱讀《色譜柱內(nèi)徑規(guī)格為什么那么多,一文帶你了解色譜柱的內(nèi)徑尺寸[行業(yè)百科]》。
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