液相色譜儀分離效果不好是什么引起的,要解決問題先找到問題[儀器解析]
液相色譜儀分離效果不好是什么引起的?在我們使用液相色譜儀的過程中,經(jīng)常出現(xiàn)儀器效果不好的問題,特別是液相色譜儀分離效果不好還會直接影響實驗進(jìn)程,很多人都不知道其中的原因,那么液相色譜儀分離效果不好是什么引起的?下面就給大家詳細(xì)介紹一下。
液相色譜儀分離效果不好可能是以下原因引起的:
1、流動相因素
流動相pH
不同基質(zhì)的填料具有不同的pH適用范圍。常溫下無定形硅膠在純水中的溶解度約為100mg·L-1,且在pH 1~9的范圍內(nèi)溶解的硅膠量幾乎是常量,考慮到溶解速度的影響,對于硅膠基質(zhì)的填料,其所能承受的流動相pH范圍約為1~8。
流動相變質(zhì)
當(dāng)前使用最為廣泛的是硅基鍵合相填料,當(dāng)以水溶液作為流動相或流動相中含有一定濃度的磷酸鹽緩沖液時,水溶液中或緩沖鹽溶液中會滋生出一些細(xì)菌或霉菌,從而堵塞固定相顆粒間的空隙。特別是對于多元自動比例混合的高效液相色譜儀來說,水相或緩沖鹽相獨立存貯,因存放時間較長而容易發(fā)生此類問題。
流動相純度
目前,廣泛使用的填料顆粒粒徑范圍在3~10μm,孔徑在6~10nm,色譜柱在使用中會有大量的流動相通過,如流動相含有微量不溶性雜質(zhì)顆粒,則很容易在柱頭部位被截留,久而久之,造成色譜柱機(jī)械性堵塞,引起柱壓升高而無法正常使用。
2、樣品因素
樣品的溶解性
樣品試樣在配制中,如有少量微粒未能完全溶解,則會隨試樣一起進(jìn)入色譜柱,同樣,會沉積在柱頭處,造成色譜柱的堵塞。
樣品的純度
樣品中可能含有待分析組分以外的各種組分或雜質(zhì),這些組分或雜質(zhì)可能會在柱內(nèi)產(chǎn)生不可逆吸附,從而,使固定相的活性點被覆蓋,保留特性發(fā)生變化。
樣品的化學(xué)性質(zhì)
待測試樣中的各種組分與填料之間應(yīng)具有化學(xué)穩(wěn)定性,比較典型的是在使用氨基鍵合柱時,應(yīng)避免使用含羰基的化合物和流動相,如,丙酮、乙酸乙酯等,以免固定相中的NH2和酐、酮發(fā)發(fā)希夫(Schiff)縮合而使固定相破壞。
以上就是導(dǎo)致液相色譜儀分離出現(xiàn)問題的主要原因,這對于我們液相色譜儀的正常使用影響是非常大的,如果儀器出現(xiàn)這些問題,我們要仔細(xì)檢查,排除困難。如需繼續(xù)了解液相色譜儀相關(guān)消息或者更多相關(guān)資訊,歡迎閱讀《液相色譜儀堵了是怎么造成的,這些要點都是影響的重要因素[原因分析]》。
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