液相色譜儀操作要注意什么，液相色譜儀利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異，對復(fù)雜樣品進(jìn)行高效分離與分析。其操作不僅要求技術(shù)精湛，還需嚴(yán)格遵循操作規(guī)范，以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和儀器的穩(wěn)定運(yùn)行，今天天恒就帶大家來了解液相色譜儀操作要注意什么。

一、流動相處理

流動相選擇：流動相必須使用HPLC級試劑，以確保其純度和穩(wěn)定性。使用前需過濾以去除顆粒性雜質(zhì)和其他物質(zhì)，常用0.45μm或更細(xì)的濾膜進(jìn)行過濾。

脫氣處理：過濾后的流動相需進(jìn)行超聲波脫氣，以去除溶解在其中的氣體，避免氣泡對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。脫氣后應(yīng)恢復(fù)至室溫再使用。

避免純乙腈作為流動相：純乙腈作為流動相易導(dǎo)致單向閥粘住，影響泵的正常工作，因此應(yīng)避免使用。

二、色譜柱維護(hù)

使用前準(zhǔn)備：使用色譜柱前，應(yīng)仔細(xì)閱讀其附帶的說明書，了解適用范圍、pH值范圍等關(guān)鍵信息。對于含鹽流動相，使用后應(yīng)先用水或低濃度甲醇水沖洗，再用甲醇徹底沖洗，以延長色譜柱的使用壽命。

輕拿輕放：色譜柱為精密儀器，使用過程中應(yīng)輕拿輕放，避免劇烈震動或碰撞。

保存條件：長時間不使用色譜柱時，應(yīng)將其取下并用堵頭封好保存。避免使用純水保存，因?yàn)榧兯讓?dǎo)致長霉，應(yīng)選用有機(jī)相（如甲醇）進(jìn)行保存。

三、儀器開機(jī)與關(guān)機(jī)

開機(jī)操作：開機(jī)前，應(yīng)檢查各組件電源連接是否正確，確保Harb電源穩(wěn)定。自上而下打開各組件電源，待BootpServer顯示有信號后，再打開工作站進(jìn)行后續(xù)操作。

沖洗系統(tǒng)：開機(jī)后，需用流動相沖洗系統(tǒng)一段時間，以確保系統(tǒng)穩(wěn)定。對于含鹽流動相，應(yīng)先用水沖洗20分鐘以上再換上含鹽流動相。

關(guān)機(jī)操作：實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，應(yīng)先關(guān)閉泵、檢測器等組件，再關(guān)閉工作站和計算機(jī)。自下而上關(guān)閉色譜儀各組件電源，確保儀器安全關(guān)閉。

四、樣品處理與進(jìn)樣

樣品處理：樣品應(yīng)提前處理至適合液相色譜分析的狀態(tài)，避免雜質(zhì)對色譜柱和儀器的損害。對于易揮發(fā)性樣品，應(yīng)采取相應(yīng)措施減少揮發(fā)。

進(jìn)樣操作：使用手動進(jìn)樣器進(jìn)樣時，進(jìn)樣前后均需用洗針液洗凈進(jìn)樣針筒。洗針液一般選擇與樣品液一致的溶劑，進(jìn)樣前必須用樣品液清洗進(jìn)樣針筒三遍以上，并排除針筒中的氣泡。

避免污染：C18柱等特定色譜柱不能進(jìn)蛋白樣品、血樣、生物樣品等易污染物質(zhì)，以免損壞色譜柱和影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

五、清洗與保養(yǎng)

清洗管路：使用緩沖溶液后，應(yīng)立即用去離子水沖洗管路及柱子一小時，再用甲醇（或甲醇水溶液）沖洗40分鐘以上，以充分洗去離子。對于柱塞桿外部，也需用去離子水沖洗。

定期檢查：定期檢查儀器各部件的連接情況，確保無漏液現(xiàn)象。若發(fā)現(xiàn)壓力異常，應(yīng)及時檢查并排除故障。

記錄與報告：使用者應(yīng)認(rèn)真履行儀器使用登記制度，記錄每次實(shí)驗(yàn)的操作過程和結(jié)果。出現(xiàn)問題時，應(yīng)及時向老師或?qū)I(yè)人員報告，不得擅自拆卸儀器。

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液相色譜儀作為現(xiàn)代分析化學(xué)的重要工具，其操作涉及多個精密步驟和細(xì)節(jié)。通過遵循正確的操作流程和注意事項(xiàng)，可以有效提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和儀器的使用壽命。《實(shí)驗(yàn)室儀器中液相色譜儀色譜峰拖尾的原因是什么？一文帶你了解【知識普及】》