使用色譜柱常見(jiàn)的幾個(gè)問(wèn)題怎么解決,掌握方法才能用好色譜柱[含使用手冊(cè)]
使用色譜柱常見(jiàn)的幾個(gè)問(wèn)題怎么解決?在我們實(shí)驗(yàn)室中色譜柱的使用一直是非常重要的,而色譜柱的使用需要一定的知識(shí)儲(chǔ)備,如果對(duì)于色譜柱的使用不了解的話,就很容易出現(xiàn)各種問(wèn)題,影響實(shí)驗(yàn)的進(jìn)程,那么使用色譜柱常見(jiàn)的幾個(gè)問(wèn)題怎么解決?下面就給大家詳細(xì)介紹一下。
色譜柱的使用容易遇到的問(wèn)題及解決方法:
1、同一根色譜柱在分析完三聚氰胺后,再分析苯甲酸、山梨酸、糖精鈉時(shí)為什么保留時(shí)間會(huì)提前?
答:色譜柱被強(qiáng)保留物質(zhì)污染后,保留時(shí)間提前和滯后的情況都有,具體要看污染物的性質(zhì),還要看分析物、固定相和污染物三者共同作用的情況,情況比較復(fù)雜,有時(shí)候比較難預(yù)測(cè)是提前還是滯后。不過(guò)你平時(shí)維護(hù)的時(shí)候,注意在測(cè)定后將污染物用有機(jī)溶劑反沖清洗,就可以減輕或避免這種情況的出現(xiàn)。建議每個(gè)分析方法用專(zhuān)門(mén)的色譜柱,長(zhǎng)遠(yuǎn)看,這樣更節(jié)省色譜柱的費(fèi)用。
2、多個(gè)樣品不好不離的時(shí)候,請(qǐng)問(wèn)該怎么通過(guò)選擇合適的柱子來(lái)提高分離度?
答:提高分離度可從三個(gè)主要影響因素來(lái)考慮,柱效、選擇性和保留因子??赏ㄟ^(guò)減小填料粒徑和增加柱長(zhǎng)提高柱效;選擇性和固定相選擇以及pH條件有關(guān),通過(guò)選擇合適的色譜柱和合適的pH,可以提高選擇性;有時(shí)候適當(dāng)延長(zhǎng)出峰時(shí)間增加保留因子,也可提高分離度。
3、普通的C18柱能作為正相色譜柱使用嗎?正相色譜體系中最常用也最普通的是那種色譜柱。正相柱在使用過(guò)程中與反向柱相比有什么需要注意的地方?
答:普通C18柱作為正相柱使用,我還沒(méi)聽(tīng)說(shuō)過(guò)。正相色譜分離模式是指固定相的極性比流動(dòng)相的極性大,反過(guò)來(lái),流動(dòng)相極性大就是反相。C18固定相屬于疏水性相對(duì)比較強(qiáng)的,疏水性強(qiáng)就是極性很弱,應(yīng)該找不出極性比它更弱的流動(dòng)相了。
正相體系常見(jiàn)的柱子有:硅膠柱、氨基柱、CN基柱和Diol二醇基柱,最普通的應(yīng)該就是硅膠柱。正相柱和反相柱比,最需要注意的是水分,正相柱對(duì)水分非常敏感,流動(dòng)相中水分含量的些微變化對(duì)保留時(shí)間影響很大,因此正相柱測(cè)定前平衡時(shí)間需要幾個(gè)小時(shí)甚至更長(zhǎng)。
以上就是色譜柱使用過(guò)程中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)的問(wèn)題及解決的方法,我們需要解除色譜柱的使用的朋友要記好這些方法,這樣才能保證實(shí)驗(yàn)的正常進(jìn)行。如需繼續(xù)了解色譜柱相關(guān)消息或者更多相關(guān)資訊,歡迎閱讀《色譜柱的構(gòu)成及類(lèi)型有哪些,色譜柱基礎(chǔ)常識(shí)介紹[今日推薦]》。
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